UPLC超高壓裝柱機的核心在于其采用高性能雙泵頭組成的超高壓泵系統(tǒng),能夠達到18000psi。通過雙活塞調節(jié)排量并結合恒壓控制技術,實現(xiàn)梯度壓力調整和流量范圍廣(0-12ml/min)的穩(wěn)定輸出。該系統(tǒng)集成了電腦軟件反控功能,可多節(jié)點設置壓力參數(shù),實時反饋至控制系統(tǒng)自動調節(jié)溶劑流量,確保填充過程中系統(tǒng)壓力恒定。這種精密的壓力動態(tài)平衡機制為均勻裝填提供了基礎保障。
區(qū)別于傳統(tǒng)色譜柱需要復雜的連接管路與接頭,現(xiàn)代UPLC超高壓裝柱機采用無管路接頭方案。例如,通過直連結構直接對接色譜柱及相關設備,消除了中間連接部件導致的死體積和泄漏風險,同時簡化了安裝流程。配合手緊式機械密封裝置,操作人員手動旋轉即可完成緊密固定,既避免了工具誤操作帶來的密封不良問題,又提升了系統(tǒng)的可靠性。
在高壓作用下,帶有微粒填料的勻漿液被高效注入色譜柱內腔。通過準確控制的線性流速和持續(xù)的壓力波動補償技術,確保微小顆粒在整個柱床內實現(xiàn)高度均勻的堆積密度。這一過程有效減少了傳統(tǒng)裝填方法可能產生的溝流或空隙率差異,從而優(yōu)化分離效果。
UPLC超高壓裝柱機的測定步驟:
1.準備工作
-流動相處理:確保所使用的流動相經過過濾和脫氣處理,以去除其中的顆粒雜質和溶解氣體。這一步非常重要,因為任何微小的顆粒或氣泡都可能影響柱效和后續(xù)的檢測結果。
-樣品預處理:對需要分析的樣品進行適當?shù)念A處理,如過濾、離心等操作,以去除大分子雜質、顆粒物和不溶性物質。對于復雜樣品,還可以采用固相萃取等方法進一步凈化,以防止這些雜質進入保護柱造成堵塞或污染。
2.安裝與連接
-保護柱與色譜柱連接:在擰緊過程中,要控制好力度,避免過度用力導致柱芯或卡套損壞,從而影響保護柱的性能。
-系統(tǒng)檢查:在開始之前,仔細檢查整個系統(tǒng)的密封性和連接是否牢固,特別是高壓環(huán)境下的各個接口處,確保無泄漏現(xiàn)象。
3.參數(shù)設置與啟動
-壓力調節(jié):根據實驗需求設定合適的壓力范圍。UPLC系統(tǒng)的工作壓力通常超過15,000 psi,可達18000psi,通過雙活塞調節(jié)排量并實現(xiàn)恒壓控制梯度壓力。
-流量調整:設置所需的流量范圍(一般為0-12ml/min),以保證均勻且穩(wěn)定的填料填充過程。
4.裝柱過程監(jiān)控
-實時監(jiān)測:在整個裝柱過程中,密切監(jiān)控系統(tǒng)的壓力變化。如果發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)壓力異常升高,可能是由于保護柱或色譜柱存在堵塞問題,應立即停止分析并排查原因,避免過高的壓力對設備造成損壞。